Ε. Δ. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomycete Φυτοφώρα μολύνσεις (Mont) de Bary προκαλεί καθυστέρηση, μια επικίνδυνη ασθένεια πατάτας και ντομάτας. Μία από τις κύριες πηγές πρωτογενούς εμβολίου P. infestans είναι αναπαυτικές αναπαραγωγικές δομές με παχιά τοιχώματα - ωοσπόρια.
Τα υβριδικά ωοσπόρια που σχηματίζονται ως αποτέλεσμα της διέλευσης γενετικά διαφορετικών γονικών στελεχών συμβάλλουν στην αύξηση της γονοτυπικής ποικιλομορφίας στον πληθυσμό, ως αποτέλεσμα της οποίας επιταχύνεται η διαδικασία προσαρμογής των στελεχών σε νέες ποικιλίες και εφαρμοσμένα μυκητοκτόνα.
Σχηματισμός Oospore P. infestans στον τομέα αυτό σημειώθηκε σε πολλές χώρες του κόσμου: Ρωσία (Smirnov et al., 1999), Νορβηγία (Hermansen et al., 2002), Σουηδία (Strömberg et al., 2001), Κάτω Χώρες (Kessel et al., 2002) και άλλες περιφέρειες. Τα ωοσπόρια είναι σε θέση να επιβιώσουν για περισσότερο από 2 χρόνια στο έδαφος σε βιώσιμη κατάσταση (Bødker et al., 2006) και να προκαλέσουν μόλυνση φυτών μετά από χειμώνα (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
Νωρίτερα αποδείχθηκε ότι τα φύλλα φυτών διαφορετικών επιπέδων του θάμνου πατάτας έχουν διαφορές στην αντίσταση στην όψιμη καταστροφή. αυξάνεται από τα κάτω φύλλα στα πάνω. Αυτή η τάση δεν εξαρτάται από την ηλικία των φύλλων, την ηλικία των φυτών και την ποικιλία της πατάτας (Vesper et al., 2003). Ταυτόχρονα, δεν μπορέσαμε να βρούμε δεδομένα σχετικά με τις διαφορές στην ένταση του σχηματισμού ωοσπόρων στα φύλλα διαφορετικών στρωμάτων του θάμνου πατάτας στη βιβλιογραφία. Ωστόσο, εάν υπάρχουν τέτοιες διαφορές, τότε θα πρέπει να λαμβάνονται υπόψη κατά τη λήψη δειγμάτων φύλλων για την ανάλυση του σχηματισμού ωοσπόρων και κατά την ερμηνεία των αποτελεσμάτων που έχουν ληφθεί από άλλους συγγραφείς. Ο σκοπός αυτής της εργασίας ήταν να μελετήσει τον σχηματισμό ωοσπόρων στα αποσπασμένα φύλλα διαφορετικών στρωμάτων ενός φυτού πατάτας, τοποθετημένα υπό τις ίδιες συνθήκες σε υγρούς θαλάμους.
Υλικά και μέθοδοι
Χρησιμοποιήσαμε 5 απομονώσεις P. infestans διαφορετικοί τύποι ζευγαρώματος που απομονώνονται από δείγματα που έχουν προσβληθεί από περιοχές της Μόσχας, του Ριάζαν και του Λένινγκραντ Από αυτά, επιλέχθηκαν 3 ζεύγη στελεχών διαφορετικών τύπων ζευγαρώματος, δίνοντας άφθονα ωοσπόρια όταν δοκιμάστηκαν σε μέσο βρώμης άγαρ.
Για δοκιμές, χρησιμοποιήσαμε φυτά πατάτας χωρίς ιούς από τις ακόλουθες ποικιλίες που καλλιεργούνται σε θερμοκήπιο (σε υπόστρωμα τύρφης): νωρίς Sandrin, Zorachka, Uladar, Osiris, mid-αρχές Ilyinsky, mid-season Yanka.
Απλά φύλλα από διαφορετικά επίπεδα του φυτού πατάτας επιλέχθηκαν για ανάλυση. Επιλέχτηκαν τρία φύλλα από το κατώτερο επίπεδο (4 κατώτερα φύλλα σύνθετων), τρία από την κορυφή (3-4 σύνθετα φύλλα στην κορυφή) και τρία φύλλα από το κέντρο του θάμνου. Ζυγίστηκαν απλά φύλλα, φωτογραφήθηκαν σε χαρτί συντεταγμένων (για τον υπολογισμό του όγκου και της περιοχής), και στη συνέχεια τοποθετήθηκαν ανάποδα στην επιφάνεια του αποστειρωμένου νερού, χύθηκαν 25 ml σε τρυβλία Petri. Στη συνέχεια, κάθε φύλλο μολύνθηκε με μία σταγόνα μικτού εναιωρήματος των απομονωμένων ζωοσποραγγείων Α1 και Α2 του τύπου ζευγαρώματος. Για τρία φύλλα που συλλέχθηκαν από κάθε επίπεδο, χρησιμοποιήθηκε ένα εμβόλιο τριών διαφορετικών ζευγών απομονωμένων προϊόντων. Ένα φύλλο μολύνθηκε με ένα μείγμα εμβολίου ενός ζεύγους προϊόντων απομόνωσης.
Για να παρασκευασθεί ένα εναιώρημα ζωοσποραγγίας, απομονώθηκαν προϊόντα απομόνωσης διαφορετικών τύπων ζευγαρώματος σε μέσο βρώμης άγαρ για 7 ημέρες, μετά την οποία τα ζωοσποραγγεία εκπλύθηκαν με αποστειρωμένο απεσταγμένο νερό. Η συγκέντρωση του εμβολίου ήταν 5-7 ζωοσπόρια στο οπτικό πεδίο του μικροσκοπίου σε μεγέθυνση 80χ. Κάθε φύλλο μολύνθηκε με μία σταγόνα μικτού εναιωρήματος απομονωμένων ζοσποραγγείων απομονωμένων Α1 και Α2.
Σε όλα τα πειράματα, χρησιμοποιήθηκαν 3 φύλλα πατάτας ανά παραλλαγή. Μετά από επώαση για 20 ημέρες στους 18 ° C, κάθε φύλλο ομογενοποιήθηκε σε γουδί με 2 ml αποσταγμένου νερού. Από το προκύπτον εναιώρημα, ελήφθησαν 3 δείγματα, από τα οποία παρασκευάστηκαν παρασκευάσματα μικροσκοπίας.
Σε κάθε παραλλαγή, εξετάστηκαν 180 οπτικά πεδία, μετά τον οποίο ο αριθμός των ωοσπορίων υπολογίστηκε εκ νέου ανά 1 mm2 επιφάνεια φύλλου. Τα αποτελέσματα μέτρησης για κάθε παραλλαγή ήταν κατά μέσο όρο.
Για τον υπολογισμό του διαστήματος εμπιστοσύνης (μ) για επίπεδο σημασίας 0,05, χρησιμοποιήθηκε ο ακόλουθος τύπος
όπου s είναι η τυπική απόκλιση, n είναι ο αριθμός των μετρήσεων, t είναι η σταθερά δοκιμής t για επίπεδο σημασίας 0,05. Όλοι οι υπολογισμοί πραγματοποιήθηκαν στο Excel (πακέτο Microsoft Office).
Αποτελέσματα και συζήτηση
Ο εμβολιασμός φύλλων που συλλέχθηκαν από διαφορετικά στρώματα του θάμνου πατάτας και τοποθετήθηκαν υπό τις ίδιες συνθήκες σε υγρούς θαλάμους αποκάλυψαν διαφορές στην ένταση του σχηματισμού ωοσπόρων. Σε όλες τις ποικιλίες που μελετήθηκαν, ο μέγιστος αριθμός ωοσπόρων σχηματίστηκε κατά τον εμβολιασμό των φύλλων που συλλέχθηκαν από την κάτω και τη μεσαία στρώση του θάμνου. Δεν βρέθηκαν σημαντικές διαφορές στο σχηματισμό ωοσπόρων στα κάτω και μεσαία φύλλα.
Ο ελάχιστος αριθμός ωοσπορίων σχηματίστηκε στα φύλλα του ανώτερου στρώματος (Εικ. 1).
Στα φύλλα της κατώτερης και μεσαίας βαθμίδας, ο μέγιστος αριθμός ωοσπόρων σχηματίστηκε στις ποικιλίες Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar και Osiris. Σχηματίστηκαν κάπως λιγότερο έντονα στα φύλλα της ποικιλίας Yanka. Ο μέγιστος αριθμός ωοσπόρων στα φύλλα του ανώτερου στρώματος παρατηρήθηκε στα φύλλα της ποικιλίας Uladar, τότε οι Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky, Sandrin πήγαν σε φθίνουσα σειρά, αλλά δεν ήταν στατιστικά σημαντικές όλες οι διαφορές.
Φιγούρα: 1. Σχηματισμός ωοσπόρων στα φύλλα διαφορετικών στρωμάτων του θάμνου πατάτας. Τα χαμηλότερα είναι τα φύλλα των τριών χαμηλότερων επιπέδων του θάμνου, τα άνω είναι 3-4 πολύπλοκα φύλλα από την κορυφή του φυτού, τα μεσαία είναι από τη μέση του θάμνου.
Οι γραμμές σφάλματος δείχνουν το διάστημα εμπιστοσύνης για επίπεδο σημασίας 0,05.
Στο πεδίο, οι μικροκλιματικές συνθήκες συμβάλλουν επίσης στο σχηματισμό ωοσπορίων στα κάτω και μεσαία φύλλα του θάμνου: υψηλότερη υγρασία, μειωμένη ηλιακή ηλιακή μόνωση και καθημερινές διακυμάνσεις της θερμοκρασίας (Harrison, 1992). Ο κορυφαίος ψεκασμός έχει ως αποτέλεσμα λιγότερα φυτοφάρμακα στο κάτω μέρος και στο κέντρο του θάμνου. Για να μειωθεί ο σχηματισμός ωοσπόρων, θα πρέπει να χρησιμοποιούνται τεχνολογίες που επιτρέπουν την επιτυχημένη παροχή μυκητοκτόνων στο κάτω και μεσαίο τμήμα του θάμνου. Τα καλά αποτελέσματα μπορούν να επιτευχθούν με τη χρήση στροβιλισμένων ψεκαστήρων αέρα και συστημικών μυκητοκτόνων που μπορούν να εξαπλωθούν σε μη επεξεργασμένα μέρη του θάμνου.
Αυτό το έργο υποστηρίχθηκε από το Ρωσικό Ίδρυμα Επιστημών (έργο αριθ. 14-50-00029).
Το άρθρο δημοσιεύθηκε στο περιοδικό "Potato Protection" (Νο. 2, 2015)